В надежде найти оправдание своему злодеянию, Екатерина зовёт к себе Рене, но он отказывает королеве и покидает Лувр. Понимая неизбежность своей кончины, Карл приходит проститься к возлюбленной и своему сыну, которому никогда не стать наследником престола. Благодаря Карлу, Генрих Наваррский скрывается в Винсентском замке от преследований королевы-матери. Екатерина представляет дело о восковой фигурке, как результат заговора Ла Моля и Генриха Наваррского против короля. Карл соглашается с планом матери, поскольку знает имя настоящего отравителя. Подкупив начальника тюрьмы, Маргарита Наваррская добивается свидания с возлюбленным. Покинутая Генрихом Шарлота заявляет, что отныне она стала врагом Маргариты. В пыточном зале Винсентской тюрьмы начинается дознание по делу Ла Моля и Коконнаса.